本文聚焦于横纹肌溶解症引发的急性肾损伤（AKI）这一临床难题，深入探讨了巨噬细胞外陷阱（METs）在其中所扮演的关键角色。研究首次揭示血小板激活诱导巨噬细胞释放METs，从而加重AKI的全新机制，并发现针对这一通路的潜在治疗方案，为横纹肌溶解症引发的AKI提供了新的治疗思路。

肌溶解症概述

肌溶解是一种由骨骼肌损伤引起的严重综合征，受损肌细胞的分解产物会进入全身循环。肌损伤通常由剧烈运动、肌肉缺氧、药物或滥用药物引起，并可能导致危及生命的并发症，如急性肾损伤（AKI）。肌溶解及其AKI并发症也可能在压榨综合征中发生，这是常见于自然灾害（如地震）和人为灾害（如战争和恐怖活动）受害者的紧急情况。受损的肌肉释放肌红蛋白，被认为是导致这种AKI形式的肾功能障碍的重要因素。尽管近期研究将巨噬细胞与肌溶解引起的AKI的病理关联起来，但具体的分子机制尚不清楚。

研究方法

1. 动物模型构建

研究者利用小鼠模型，通过向小鼠肌肉注射甘油诱发横纹肌溶解症，以观察其肾脏损伤情况。同时，运用基因敲除技术生成特定基因缺失小鼠（如PAD4基因敲除小鼠）以及通过药物抑制剂干预特定信号通路，以对比不同小鼠在模型诱导后的肾脏损伤指标，探究METs的作用。

2. 细胞类型耗竭实验

为研究巨噬细胞、中性粒细胞及血小板在横纹肌溶解症引发AKI中的具体贡献，研究者采用特定手段耗竭这些细胞类型。例如，使用克隆霉素脂质体耗竭巨噬细胞，抗Ly6G抗体耗竭中性粒细胞，以及抗GPIbα抗体耗竭血小板。通过对比耗竭组与对照组小鼠在模型诱导后的肾脏损伤指标，以明确各细胞类型在病理过程中的作用。

3. 免疫组化与免疫荧光染色

研究者利用免疫组化和免疫荧光技术对小鼠肾脏组织进行染色，以检测METs的存在与分布。采用特异性标记抗体（如针对CitH3和F4/80）并结合荧光显微镜观察，分析METs在肾脏损伤区域的具体分布情况。

4. 体外细胞实验

研究者体外培养THP-1单核细胞系并诱导其分化为巨噬细胞，以模拟体内血小板激活和METs形成过程。通过预处理巨噬细胞（如添加DNaseI、DPI、CLA等），观察不同干预对METs形成的影响，进而探讨血小板激活、ROS生成及PADs活性等环节。

研究结果

1. METs在AKI中的作用

研究发现，横纹肌溶解症模型小鼠的肾脏中存在以无定形DNA结构形式存在的METs，这些METs与citrullinated histone H3（CitH3）共定位，仅在肾小管中出现，未见于肾小球。当与野生型小鼠相比，PAD4基因敲除小鼠和经PAD抑制剂处理的小鼠，其血清肌酐和血尿素氮等AKI指标均显著降低，肾脏损伤程度减轻，这表明METs在AKI的发生中起着关键作用。

2. 巨噬细胞与血小板的协同作用

研究进一步显示，巨噬细胞和血小板的耗竭均可以显著减轻横纹肌溶解症引发的肾脏损伤，而中性粒细胞的耗竭则无此效果。免疫荧光染色结果表明，CitH3仅与巨噬细胞标记物F4/80共定位，而不与中性粒细胞标记Ly6G共定位。血小板激活后，通过与巨噬细胞上的Mac-1受体结合，引发ROS生成与组蛋白去精氨酸化，从而促进METs的形成。

3. 潜在治疗策略

研究者评估了多种干预药物，发现血色素结合蛋白（hemopexin）能够有效抑制NET和MET的形成，进而减轻AKI损伤。此外，乳铁蛋白在体外实验中显著减少血小板诱导的MET形成，并在体内实验中预防了甘油诱导的横纹肌溶解症引发的肾脏损伤。

结论

本研究首次揭示METs在横纹肌溶解症引发AKI中的关键作用，并明确血小板激活、巨噬细胞参与及ROS和PADs等环节在METs形成中的重要性。此研究证实了巨噬细胞与血小板间的协同作用，提示针对这一信号通路的干预可能为治疗AKI提供新策略。发掘的hemopexin及乳铁蛋白等药物展现出对横纹肌溶解症引发AKI的潜在治疗效果，为临床治疗提供了新的方向。今后需进一步进行临床试验，以验证这些药物的疗效和安全性，旨在为横纹肌溶解症患者提供新的治疗选择。

在此研究中，尊龙凯时所提供的血色素结合蛋白（hemopexin）为研究提供了支持，使得对heme-activated platelets在横纹肌溶解症引发急性肾损伤中的作用得以进一步探究。这些成果对未来治疗AKI的方法发展具有重要参考价值。