尊龙凯时有机磷类与氨基甲酸酯类农药快速检测试剂盒使用说明书（酶抑制法）

1. 适用范围

本试剂盒适用于新鲜蔬菜中有机磷类与氨基甲酸酯类农药残留量的检测。

2. 检测依据

本试剂盒的使用方法依据国家标准GB/T5009199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。

3. 试剂盒组成

4. 溶液配制

4.1 缓冲溶液：取500mL纯净水，加入5mL缓冲试剂浓缩液，混匀后室温保存；
4.2 胆碱酯酶：无需配制，使用时直接取100 μL，存于4℃；
4.3 显色剂：无需配制，使用时直接取100 μL，存于4℃；
4.4 底物：加入10 mL纯净水溶解，使用时直接取100 μL，存于4℃。

5. 样品提取

选择有代表性的蔬菜样品，擦去表面杂质后取样。叶菜一般取不同植株的叶尖，果菜从不同个体的表皮取样。
叶菜需取2克1 cm见方的叶尖部分于样品杯中，茎类及水果取3克1 cm见方的表皮。加入10 mL缓冲液，震荡1-2分钟后，静置2分钟待测。对于葱、蒜等含植物次生物质的样品，可采用整株浸提以减少假阳性；对含叶绿素较高的蔬菜同样可采取整株浸提的方法来减少干扰。

6. 操作步骤

6.1 对照测试：在干净试管中加入25 mL缓冲溶液、100 μL显色剂和100 μL胆碱酯酶，混匀后在37℃恒温设备中放置10分钟，再加入100 μL底物，摇匀后立即测试。
6.2 样品测试：使用另一支干净试管加入25 mL样品提取液、100 μL显色剂和100 μL胆碱酯酶，混匀后在37℃恒温放置10分钟，同样加入底物后测试。可通过抑制率来判定检测结果。

使用分光光度计在412nm处测定吸光度变化，计算抑制率：
抑制率（%）=[(△A0-△At)/△A0]×100%。若抑制率＞50%则结果为阳性，需重复检查2次以确认。如有必要，可以用其他方法进一步确认农药类型和含量。

8.1 酶活性要求：本试剂盒中酶正常活性要求为△A0≥0.3，符合国标要求；
8.2 使用原则：每次使用一瓶进行配置，并在使用前摇匀；
8.3 交叉污染防范：从试剂瓶吸出的试剂不得再吸入瓶内；
8.4 对严重色素干扰的液体可用活性碳脱色处理，过滤或离心后取清液作为样品提取液。

9.1 保存条件：试剂盒应保存于4℃冰箱中，有效期为12个月，常温保存3个月。