尊龙凯时为您介绍人早幼粒白血病细胞HL60的培养说明。本指南包含了细胞培养条件、处理步骤及售后条款，旨在帮助科研人员更好地管理细胞培养工作。

一、细胞培养条件

细胞名称：人早幼粒白血病细胞HL60

生长特性：贴壁生长

冻存条件：无血清冻存液

培养体系：IMDM + 20% FBS + 1% P/S

传代方法：首次建议1:2传代，使用无菌离心管收集培养基。若对比培养效果不理想，建议直接购买尊龙凯时的完全培养基。

二、细胞收到后的处理

收到细胞后，应尽快培养至良好状态并用完全培养液灌满，封好瓶口。这是运输细胞的最佳方法。在操作时，用75%酒精消毒细胞瓶，然后在超净台中进行无菌处理，将细胞瓶放置在37℃、5% CO2培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。显微镜下观察细胞的生长情况，并拍照保存不同倍数的图像（建议40x, 100x, 200x各一张），前三天的照片是重要的售后依据，不提供照片默认状态良好。

三、细胞培养步骤

a) 细胞传代

当细胞汇合度未超过80%时，将培养液收集至离心管中，留5ml完全培养基，并放入37℃、5% CO2孵箱培养；若密度超过80%，可进行传代，步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml，置于37℃培养箱消化1-2分钟，观察细胞状态。
3. 快速加入5ml培养基终止消化，轻轻吹打细胞后吸出，再转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟。
4. 忽略上清，重悬细胞，并按照1:2比例分瓶传代，补充5-8ml新培养基，放入37℃、5% CO2培养箱。

b) 细胞冻存

1. 当细胞覆盖80%面积时，弃去培养液并用PBS清洗一次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞状态，待细胞变圆后加入5ml培养基结束消化。
3. 转移至15ml离心管，1000RPM离心5分钟。
4. 加入1ml无血清冻存液，混匀后转移至冻存管中，放入-80℃冰箱保存。

c) 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管，并快速置于37℃水浴中解冻。
2. 将细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000RPM离心5分钟。
3. 重悬后接种至T25培养瓶中，放入37℃、5% CO2培养箱。
4. 第二天换新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

在运输过程中，部分细胞可能会出现脱落，这是正常现象。如脱落细胞较多，请收集培养液并离心，处理后按标准流程进行分瓶传代。

五、售后条款

尊龙凯时确认细胞出现问题的情况及处理办法：

1. 运输过程中细胞丢失或瓶身破损等情况可重发。
2. 细胞污染需在收到后48小时内提供实验结果，核实后可重发。
3. 若因干冰或常温发货导致细胞活性问题，需提供真实情况照片，符合条件者可重发。
4. 细胞出现问题但未提供前三天照片的，不予重发。

在任何情况中，若因客户原因导致细胞状态不佳，则不予以重发。如需了解更多信息，请访问尊龙凯时，我们将竭诚为您服务。