校正染料（ROX）用于校正加样误差或孔间误差，它提供了稳定的基线，从而显著提高了定量分析的精确度和重复管之间的数据重现性。不同仪器对于ROX的需求有所不同。在基线PCR的初始几个循环中，荧光信号几乎没有变化，因此阈值可被认为是可靠的最小荧光值。CT值是扩增曲线与阈值交点的横坐标。

二、结果有效性判断

通过融解曲线单峰（染料法）和扩增曲线的指数扩增区域来进行判断。复孔间的CT值标准差（STD）应小于0.2。阈值的设置要合理，确保其位于指数增长期：仪器通常会自动计算阈值，但并非所有情况下都能得到合理的结果，必要时需进行手动调整。

在无模板对照（NTC）实验中可以确认无气溶胶污染，若ΔCT=NTC（CT值）- 目的基因（CT值）≥3或≥5，可认为气溶胶污染对实验结果准确性没有影响。无逆转录对照（NRT）则可以确认无基因组残留，若ΔCT=NRT（CT值）- 目的基因（CT值）≥3或≥5，同样可以认为基因组残留不会影响实验结果的准确性。

待测CT值需落在线性范围内且扩增效率需符合标准，PCR扩增效率（e）应在90%-120%之间。作为一家专注于生物医药领域的企业，中科腾宇（广州）科技技术有限公司致力于为客户提供高质量的产品和技术服务，努力发展为基因治疗和细胞治疗的生物科技公司。我们总部位于广州，服务覆盖全国。

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